付彥秋　于樹(shù)軍　張乃勇
(長(zhǎng)春市園林科學(xué)研究所)

摘　要：以矮牽牛種子為外植體，將其接種在MS+6?BA1mg/L+NAA0.03mg/L的培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，7～10天種子開(kāi)始萌芽，15～20天新芽被誘導(dǎo)成愈傷組織，30天左右愈傷組織被誘導(dǎo)分化出叢生芽，再將叢生芽接種于MS+6?BA0.5 mg/L+NAA0.05 mg/L的培養(yǎng)基中進(jìn)行繼代培養(yǎng)出成苗，最后將成苗接種于1/2MS+NAA0.03mg/L培養(yǎng)基中，5～7天可生根，7～10天生根率可達(dá)100%。
　　關(guān)鍵詞：矮牽牛；組織培養(yǎng)；快速繁殖
　　矮牽牛（petunia hybrida vilm）又名“碧冬茄”、“靈芝牡丹”，為茄科多年生草本，通常作一年生栽培。原產(chǎn)南美，為矮牽牛（pviolacea）與腋花矮牽牛（p.axillaries）的雜種。矮牽牛花大，花色豐富，花期長(zhǎng)，栽培管理省工，園林綠化上需求量大。但由于重瓣或大花品種常不易結(jié)實(shí)或?qū)嵣绮灰妆４婺副镜膬?yōu)良性狀，常采用扦插繁殖，但扦插繁殖速度太慢，滿足不了生產(chǎn)發(fā)展的需要，而組織培養(yǎng)可在短時(shí)期內(nèi)獲得大量的優(yōu)良種苗。為此，我們于2000～2001年開(kāi)展了矮牽牛組培快繁的研究工作。
　　一、材料與方法
　　(一)材料
　　試驗(yàn)所用材料為美國(guó)矮牽牛雜交一代新品種
　　(二)方法
　　1?材料的消毒和接種
　　將矮牽牛種子用少量洗滌劑洗去表面灰塵，用蒸餾水沖洗干凈，放入70%酒精中消毒2分鐘，之后用無(wú)菌水沖洗3次，再用0.1%升汞溶液消毒10分鐘，用無(wú)菌水沖冼4次備用，將消毒后的種子在無(wú)菌條件下接種于培養(yǎng)基中。
　　2?培養(yǎng)基的篩選
　　本試驗(yàn)采用的培養(yǎng)基為MS培養(yǎng)基，附加的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)為BA和NAA；蔗糖濃度為3%，卡拉膠濃度為0.4%，PH值為5.8。培養(yǎng)基篩選時(shí)，首先進(jìn)行細(xì)胞分裂素（BA）濃度的篩選。
　　方法：
　　在添加0.03 mg/LNAA的培養(yǎng)基中添加不同濃度的BA。其濃度為0.1、0.5、1.0、和1.5 mg/L，培養(yǎng)30天后，根據(jù)培養(yǎng)物的生長(zhǎng)狀況和增殖數(shù)量確定最佳的BA濃度。然后進(jìn)行生長(zhǎng)素（NAA）濃度的篩選，其方法為：在上述篩選出最佳BA濃度的培養(yǎng)基中添加不同濃度的NAA。其濃度為0.01、0.02、0.03和0.04 mg/L。根據(jù)培養(yǎng)物的生長(zhǎng)狀況和增殖數(shù)量，確定最佳生長(zhǎng)素濃度。
　　3?培養(yǎng)條件
　　接種后的培養(yǎng)物放置在培養(yǎng)架上進(jìn)行培養(yǎng)，出芽前需遮光，培養(yǎng)溫度控制在23±2℃。光強(qiáng)為1500～2000LX，每天光照14小時(shí)。
　　二、結(jié)果與分析
　　(一)芽的誘導(dǎo)
　　將滅菌的種子接種在MS+不同濃度的6?BA+NAA0.03 mg/L的培養(yǎng)基上，6?BA的濃度為0.1、0.5、1.0和1.5 mg/L，經(jīng)10～30天，種子萌發(fā)，并誘導(dǎo)出愈傷組織，同時(shí)分化出許多叢生芽。結(jié)果表明，6?BA的濃度以1.0 mg/L為最佳。以同樣方法篩選NAA最佳濃度為0.03 mg/L。
　　(二)芽的增殖和生長(zhǎng)
　　將分化出的叢生芽分別轉(zhuǎn)接到MS+6?BA0.1mg/L+NAA0.02mg/L（處理1）、MS+6?BA0.3mg/L+NAA0.02 mg/L（處理2）、MS+6?BA0.5 mg/L+NAA0.02 mg/L（處理3）、MS+6?BA0.5 mg/L（處理4）培養(yǎng)基上，20～30天繼代一次，從表1看出，在生長(zhǎng)素濃度相同情況下，高濃度的6?BA提高了苗的繁殖系數(shù)，且苗的生長(zhǎng)狀況也隨之發(fā)生變化，在不含生長(zhǎng)素的培養(yǎng)基中，苗的生長(zhǎng)受到影響。

表1 不同培養(yǎng)基對(duì)試管苗增殖和生長(zhǎng)的影響（見(jiàn)園林科技信息）

表2不同濃度對(duì)試管苗生根的影響（調(diào)查時(shí)間為10天）（見(jiàn)園林科技信息）

　　當(dāng)試管苗根長(zhǎng)2～3cm時(shí)，可進(jìn)行試管苗移栽，根據(jù)試驗(yàn)，以珍珠巖為基質(zhì)的幼苗移栽成活率為68%，而以沸騰爐渣為基質(zhì)和以蛭石和珍珠巖（比例為2：1）為基質(zhì)的幼苗成活率分別為92%和93%，這說(shuō)明以沸騰爐渣、蛭石與珍珠巖混合為基質(zhì)的均可。試管苗移栽后管理非常重要，要注意控制好溫度、濕度及光照，試管苗移栽后要搭塑料拱棚，光強(qiáng)時(shí)要適當(dāng)遮蔭，每天早晚通風(fēng)一次，一周后將塑料拱棚去掉，試管苗移栽20天后，可移栽到營(yíng)養(yǎng)土中（上盆），一周后可移至室外。
　　三、結(jié)論
　　我們采用組織培養(yǎng)的方法快速繁殖矮牽牛獲得成功，并研究出適于矮牽牛快繁的培養(yǎng)基配方和試管苗快速繁殖技術(shù)。外植體的誘導(dǎo)及芽的誘導(dǎo)以MS附加6?BA1.0+NAA0.03mg/L效果最好，芽的分化比較理想的培養(yǎng)基是MS+6?BA0.5mg/L+NAA0.02mg/L，根的誘導(dǎo)以1/2MS+NAA0.03mg/L效果最佳，根的誘導(dǎo)率為100%，試管苗移栽采用沸騰爐渣為基質(zhì)以及蛭石和珍珠巖混合（2：1）為基質(zhì)效果均較好。移栽成活率分別為92%和93%。

　　參考文獻(xiàn)：
［1］李瑛，鄭國(guó)慶.重瓣矮牽牛的組織培養(yǎng).北方園藝，1993，2.